水平板電泳槽結構、使用方法及水平板電泳注意事項

不同的物質在一定的電場強度下，因為所帶電荷不同，所以受到的引力不同，往相反的電極泳動的速度不同從而達到分離的目的。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離目的的技術，稱為電泳技術。

主要結構：

緩沖液的主槽、凝膠托盤、試樣格（梳子）、擋板和電泳導線共同組成水平電泳槽。

使用方法：

1.首先在平臺上放置凝膠托盤，在槽中插入擋板。冷卻融化的瓊脂糖溶液到55攝氏度，使用少量的瓊脂糖凝膠封邊玻璃板，放樣品梳。然后連續地往模子里倒入融化的瓊脂糖溶液（厚度取決于樣品的濃度，需要防止混入氣泡），在室溫條件下凝固。

2.等到凝膠聚合后，將梳子輕輕地拔掉，先拔一邊，垂直拔出會導致膠孔產生真空，帶出部分凝膠。往電泳槽內移入凝膠托盤，將緩沖液倒入，凝膠必須全部被浸沒。

3.往梳井里加樣，防止氣泡進入，不能將槍頭插入太深，避免使得膠塊穿透。

4.將上蓋蓋好，將電泳槽和電源之間的電泳導線連接。

5.留意正負極不要接錯，檢查完畢后將電泳儀電源打開。電壓和電流的大小通過凝膠板的厚薄來選擇。

6.當溴酚藍指示劑前沿達到膠底部的3/4時將電泳停止。在完成電泳實驗后，需先將電泳儀電源關閉，然后將電泳導線拔出，再將電泳槽上蓋打開，將凝膠托盤取出。

7.往染色區的通風櫥子中移入凝膠使用EB染色液進行10-20min的染色，然后使用沖洗盤將膠片上多余的EB染色液沖洗掉，再使用海綿進行兩次徹底的吸水，直到沒有水痕留在膠片上，使用保鮮膜將膠片包裹好，放入凝膠成像儀中進行凝膠成像。

注意事項：

1.不允許將EB染色液加入電泳槽中，必須在電泳結束后且在染色區內進行染色。

2.正負級分不清楚，造成樣品跑入緩沖液。黑色為負極，紅色為正極，樣品由負極往正極跑，需在靠近負極一端加樣。

3.加樣的時候，不能將槍頭插得太深，避免膠塊被穿透。

4.必須按照marker要求的濃度對膠的濃度進行制備，不然，小分子物質會從膠塊中跑出。

5.若沒有經驗，Z好定時，不然樣品可能因為疏忽從膠塊中跑出。

6.樣品必須在上樣緩沖液中完全溶解，不然在凝膠中不能移動。采用同種緩沖液制膠和電泳，點樣必須在緩沖液加到凝膠之上以后。