1982年,美國國立衛生院Ito博士研制開發了一種新型的、連續gao效的液液分配色譜技術--高速逆流色譜法,這種技術不同于其它色譜技術,任何固態載體其均不需要,所以可以使固相載體表面與樣品發生反應而造成的樣品污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響得以避免,同時其具備較高的回收率,低廉的價格,較大的進樣量,較為廣泛的適用范圍以及快速等優點。所以其廣泛應用于生物、醫藥、食品、材料、化妝品和環保等領域,其在天然產物活性成分的分離純化領域特別受到重視。
前景
這些年以來,溶劑體系有了越來越寬泛的選擇范圍,一些人表示流動相可以使用超臨界二氧化碳,對于化合物的分離而言,其擴散性高,粘度低,無論是流體特性還是環境均相對友好,其相較于其他溶劑,優勢非常的明顯,也有一些人表示流動相可以使用制冷劑。又有一些人提出在高速逆流色譜分離中使用三相溶劑體系,能夠非常好的分離寬極性范圍的樣品。到目前為止,僅在分離標準品混合物時使用三相溶劑,還沒有在分離具體天然產物時使用三相溶劑。可以想象,復雜天然產物以及藥物的分離若得到進一步的發展,那么它的應用前景一定非常大。
現在Z先發展起來的制備色譜技術為pH區帶逆流色譜,其可以使樣品提高超過10倍的負載容量。就算物質的含量非常低,其也可以高度的濃縮。其是將保留劑和洗脫劑這一對試劑加入到固定相和流動相中。在管柱內保留樣品中的各組分為保留劑的作用,當含有洗脫劑的流動相通過一定流速從固定相穿過,因為酸堿反應Z終達到平衡。溶質的出峰時間取決于溶質的分配系數與標度值的差異。按照不同組分的Pka以及不一樣的疏水性來使分離實現。
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