用來進行蛋白質、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的測定的儀器,稱為氨基酸分析儀。必須先蛋白質及肽水解成單個氨基酸,然后再進行氨基酸分析。其是以陽離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測定為基準的離子交換色譜儀。下面就讓小編帶你了解一下氨基酸分析儀的洗脫過程和故障解決。
洗脫過程
1.在ph2.2的條件下,氨基酸都帶正電荷,都會被吸附在陽離子交換樹脂上,然而具有各不相同的結合強度。
2.氨基酸隨著緩沖液在離子交換柱上流動不斷地附,解吸附,因為氨基酸酸堿性、極性、分子大小等性質的不同,就會產生不同的吸附強度。
3.氨基酸不同,其離子交換樹脂的親和力也不一樣:酸性氨基酸及羥基氨基酸<中性氨基酸<芳香族氨基酸<城性氨基酸。
4.當流動相PH值提高的時候,就會減少氨基酸的正電荷,減弱吸附力,Z后從離子交換柱上洗脫下來。酸性和帶羥基氨基酸、中性氨基酸、堿性氨基酸為依次洗脫的順序。
5.氨基酸標準液中各種氨基酸在氨基酸自動分析儀上被洗脫的順序一定;標準液各種氨基酸的濃度一定,洗脫峰的面積一定;通過這能夠將樣品中各種氨基酸的含量計算出來。

故障解決
故障現象1:基線漂移
產生原因1:管路漏液
判斷方法1:用濾紙試漏
解決方法1:修復
產生原因2:分析柱被污染
判斷方法2:分離度下降
解決方法2:長時間用緩沖液5(氫氧化鈉溶液)再生或重新填充柱子
產生原因3:緩沖液不純
判斷方法3:緩沖液B1~B5逐個與茚三酮反應,對基線狀況進行觀察。
解決方法3:緩沖液和反應液使用優質試劑和超純水配置。
產生原因4:除氨柱劣化。
判斷方法4:氨峰很高
解決方法4:對氨柱重新填充。
故障現象2:泵1泵2壓力都高
產生原因:反應柱被堵塞
判斷方法:取下泵1泵2通往混合器的連接管路,此時若兩個壓力下降明顯就能夠斷定
解決方法:取下反應柱往干凈的容器中放入,并且將蒸餾水注入,利用超聲波凊洗器凊洗半個小時,之后反裝回原位利用泵2走水(用R3),根據壓力對流量進行設定,從小到大一直到壓力正常為止,Z后恢復反應柱到原狀。
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