定氮儀使用注意事項

定氮儀使用步驟

diyi步，加酸以及加堿量的確定

按消煮樣品時加入硫酸量計算出所需加入氫氧化鈉的量，根據消煮液中氮的大約含量計算所需加入的硼酸量。根據計算量確定加堿時間和加硼酸時間。

第二步，開啟機器

打開電源開關，顯示屏上顯示出“P”。按“轉換”鍵，硼酸狀態指示燈亮，按加好鍵或按減號鍵，設定加硼酸時間。再按“轉換”鍵，使加堿狀態指示燈亮，按加號鍵或按減號鍵，設定加堿時間。

第三步，將空的三角瓶放在托盤上，此時托盤處在高位。把裝有樣品的消煮管放在托盤上，要與上端的橡膠塞裝緊。

第四步，按“啟動”鍵，儀器開始自動向三角瓶中加硼酸，向消煮管內加堿，然后進入蒸餾狀態，待三角瓶中冷凝液達到預定體積量時，三角瓶托盤落下，再蒸餾12s后蒸餾停止工作，發出提示聲。在蒸餾過程中吸收液逐漸變成藍綠色。若用手動蒸餾，要用pH試紙測試一下蒸餾液，根據酸堿性判斷是否蒸餾結束。若pH試紙顯中性或酸性，即說明蒸餾結束，若顯堿性，需要再繼續蒸餾直至顯中性或酸性。

第五步，取下三角瓶，用酸滴定管滴定三角瓶中的液體， 顏色由藍綠色變為磚紅色，即到達終點。按含氮量-粗蛋白質含量公式進行計算，取得測定結果。

定氮儀使用的注意事項

(1)樣品前處理注意事項

樣品應盡量選取具有代表性的，大塊的固體樣品應用粉碎設備打得細小均勻，

液體樣要混合均勻。

(2)模塊化消解裝置消化樣品注意事項

消化過程中，首先確保濃硫酸量足夠，如樣品脂肪含量較高時，應適當增加硫酸量；其次對某些樣品炭化易產生泡沫，這時可采用消解爐曲線升溫或手動控制升溫，讓消解溶液沸騰均勻后再提高消解溫度，直至消化液呈透明藍綠色再消化0.5h或1h。因為炭化過程中，升溫速度過快會使樣品溢出消化管或濺起粘 附在管壁導致無法消化完全而造成氮損失，影響結果準確性。

(3)上機測定注意事項

儀器稀釋水采用中性去離子水；蒸汽發生瓶內的水必須保持酸性；硼酸吸收液配制時應用中性去離子水，避免堿性物質的混入，盛裝硼酸吸收液的容器應刷洗干凈；堿液應用中性去離子水配置；滴定用的標準酸必須按照標準配制和標定。

上機測試樣品前，應打開儀器預熱，放一支消化管空蒸一次，排除蒸餾管路中的空氣。

蒸餾時必須加堿，加入堿的作用一是中和硫酸，二是使溶液處于強堿性，這樣才能使(NH4)2SO4變成NH3被硼酸吸收，通常是消化取用濃硫酸的四倍體積(40%NaOH)。硫酸銅可作為催化劑，并在蒸餾時作堿性反應指示劑，氫氧化鈉是否足量。可借助硫酸銅在堿性條件下生成的褐色沉淀或深藍色的銅氨絡離子指示。若溶液的顏色不改變，則說明所加的堿液不足。

蒸餾是否完全，半自動定氮儀可用精密pH試紙測冷凝管的冷凝液來確定，中性說明已蒸餾完全。全自動定氮儀目前主要是以蒸餾體積與設置時間(經驗值)確保蒸餾完全。

蒸餾結束后，滴定主要是是分為人工滴定和機器自動滴定計算和打印實驗結果。要求操作者根據實際情況，按照要求操作。

(4)其它注意事項

1.若設定的加硼酸時間或加堿時間為零秒鐘，則自動 工作過程完成后顯示窗顯示“E”不閃動，發出“嘀”聲約2s提示音。

2.若按下“啟動”鍵后，三角瓶托盤仍處于下端，顯示窗顯示自下而上閃動的“-”符號，并發出“嘀-嘀-嘀”的提示音，提示應放空三角瓶在托盤上，使托盤升起。

3.混合指示劑在堿性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。

4.氨是否完全蒸餾出來，可用pH試紙測試餾出液是否為堿性。

5.向蒸餾瓶中加入濃堿時，往往出現褐色沉淀物，這是由于分解促進堿與加入的硫酸銅反應生成氧化亞銅沉淀。

6.儀器應避免安裝在陽光直射及過冷、過熱或潮濕的地方，室內溫度不得超過10℃—30℃，通風要好，應有良好的散熱條件。

7.儀器前部槽皿中若積有液體，應經常擦凈。

8.長期使用后，在加熱器上會結有水垢，它將影響 加熱效率。若水垢過厚，在關機狀態下斷電，可將蒸汽發生器頂上的一個旋塞擰下，在管口處插入一個小漏斗，注入除垢劑或冰醋酸清洗水垢(也可用稀釋后的硫酸)。清洗后，打開機箱內蒸汽發生器排水節門將水排凈，并加入清水多次清洗。

定氮儀使用需要考慮的幾個問題：

1.樣品在蒸餾裝置中反復翻滾，對操作者構成危險么?

傳統的定氮儀裝置，可能會對實驗人員存在潛在的危險。定氮儀蒸餾器就不會，它充分考慮了安全問題，在設計時增加了安全門裝置，保證了實驗人員的人生安全。同時，凱式定氮儀的劇烈翻滾，是因為水蒸氣大量進入到消化管，此時凱式定氮儀有自身的超壓保護裝置，可以保持內部常壓，不會對操作人員造成傷害。

2.對蒸餾裝置中添加的水，有什么要求?

定氮儀的蒸餾水桶中裝的水，要求是蒸餾水或者純水，而且如果長時間地不用凱式定氮儀，Z好把蒸餾器中的水放掉。

3.定氮儀開機蒸餾器內不加水怎么解決?

開機半分鐘中檢查蒸餾水桶是否漏氣，能被氣充鼓是正常;檢查蒸餾水桶內水位是否超過三分之一，不夠補齊。

4.樣品在消化爐時，可否對消化爐進行強火加熱?

樣品消化時，不能用強火。如果樣品的糖分或者脂肪含量很高，那么我們一定要注意控制溫度，以免大量泡沫噴出凱式燒瓶，造成人員的危險，同時測定結果也會受到一定的影響。消化爐，有水浴鍋加熱和電熱板加熱。水浴鍋加熱的Zda好處是受熱均勻。

5.凱氏燒瓶的容量對實驗會有影響么?

Z適宜多少容量的凱氏燒瓶，能夠大大提升實驗速率。一般我們選擇800或者1000ml的，容量大的，能夠縮短氨化時間，另外加熱均勻性和氨化效率都比較好。在添加樣品時，盡量不要將樣品粘附在瓶頸上，以免影響實驗結果。

6.消化爐在進行樣品消化時，我們選擇水浴鍋加熱還是用電熱板?

一般我們采用水浴鍋加熱的方式。水浴鍋加熱均勻，溫度上升穩定，大大提高消化效率，以及人身安全。

定氮儀使用的優缺點：

凱氏定氮法的主要優點是按照凱氏定氮原理設計的定氮儀運用化學、物理學、電學、自動控制等方面新技術采用可以批量處理樣品，簡單易于操作，對食品、農作物、肥料、土壤、水等物質中的氮、蛋白質含量進行定量測定，其結果精確可靠，且能夠滿足高通量檢測要求，基本能夠客觀的反映出樣品含蛋白質水平。同時還可以應用于揮發性鹽基氮，二氧化硫燈物質的測定，應用范圍廣。

凱氏定氮法的主要缺陷是方法的特征性差，得到的測量結果只能代表樣品中所有含氮化合物的總量，不能準確表示蛋白質的含量，這是因為在消化過程中除蛋白質中的氮轉化成(NH4)2SO4外，一些非蛋白質類的含氮化合物(如生物堿、尿素、三聚氰胺等)也能轉化成(NH4)2SO4，計算氮的含量時，認為所有的氮都來源于蛋白質，因此測定結果比實際值偏高，所以定氮儀也存在此問題。

因此，使用凱氏定氮法這一技術的前提便是：樣品是真正的蛋白質樣品，沒有被造假。參照此前提，技術便能準確為人服務。

隨著社會的進步，科學技術的發展。國內的分析儀器行業，也開始蓬勃發展起來，以前我國僅能生產半自動型，且技術含量低，可靠性差，水平落后，自動定氮儀只能依賴進口，并且價格昂貴。如今，我們已經生產出半自動，全自動定氮儀、肥料定氮儀。全自動定氮儀的技術含量Zgao，滴定系統采用官的方批準的顏色法滴定系統(AOAC, EPA, DIN, ISO,GB等明文規定)，柱塞泵采用高精度直線步進電機推進保證結果準確性。

綜上所述，隨著科技的進步，科研人員的努力，定氮儀已邁上一個新的臺階，并在食品中蛋白質的測定中定為國家標準方法(GB50095-2010食品中蛋白質的測定);而其它一些改進法有待進一步接受實踐檢驗和完善。在保證準確度的前提下，定氮儀的改進向簡便、gao效、系統化、自動化、智能化等方向迅猛發展，以滿足各行業的不同需求。