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電泳分離的應用、分類及主要因素

更新時間:2025-10-18 19:17:21 類型:電泳儀的常見故障|注意事項 閱讀量:2049
導讀:溶質在電場移動中移動速度不同而分離的方法,叫做電泳分離,溶質必須帶電,它于表面吸附離子而帶電或者它本身就是離子。

溶質在電場移動中移動速度不同而分離的方法,叫做電泳分離,溶質必須帶電,它于表面吸附離子而帶電或者它本身就是離子。因為其帶電性質及其顆粒大小和形狀不同,不同的物質在一定的電場中它們的移動方向和移動速度也各有差異,所以可以分離出它們。它們所帶電荷的種類決定了物質顆粒在電場中的移動方向。凈電荷為零的顆粒在電場中不移動,帶負電荷的顆粒則向陽極移動,帶正電荷的顆粒向電場的陰極移動。


影響電泳分離的主要因素

顆粒在電場中的移動速度由其本身所帶的凈電荷量來決定,同時顆粒形狀和顆粒大小也是其的影響因素。除此以外電場強度、溶液pH、離子強度、及支持體的特性和溫度等外界條件也會對顆粒在電場中的移動速度產生影響。


15.jpg


1.電滲

在電場中,溶液對于固體支持物的相對移動稱為電滲


2.支持介質的篩孔

分離生物大分子的電泳遷移速度明顯的受到支持介質的篩孔大小的影響。


3.溫度

電泳時電流通過支持介質會產生熱量。


4.電場強度

每厘米距離的電壓降即是電場強度。電場強度對顆粒的泳動速度起著十分重要的作用。電場強度越高,帶電顆粒的泳動速度越快。根據電場強度的大小可將電泳分為高壓電泳和常壓電泳。常壓電泳的電場強度一般為2~10V/cm,電壓為100~500V,電泳時間從幾十分鐘到幾十小時,多用于帶電荷的大分子物質的分離;高壓電泳的電場強度為20~200V/cm,電壓大于500V,電泳時間從幾分鐘到幾小時,多用于帶電荷的小分子物質的分離。


5.溶液的pH

溶液中顆粒分子的解離程度取決于溶液的pH,也就是說顆粒分子所帶凈電荷的多少取決于溶液的pH。對于兩性電解質來說不僅顆粒分子所帶電荷的種類取決于溶液的pH,而且凈電荷的數量也由溶液的pH來決定。溶液的pH等于某溶質的等電點時,其凈電荷為零,泳動速度也等于零,溶液的pH離其等電點越遠,顆粒所帶凈電荷越多,泳動速度越快,溶液的pH離其等電點越近,顆粒所帶凈電荷越少,泳動速度越慢。所以應該在適當的數值上選擇電泳時溶液的pH,并且需采用緩沖液維持pH恒定。 


6.溶液的離子強度

溶液的離子強度越高,顆粒的泳動速度越慢。


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