基因擴增儀的分類

　　基因擴增就是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制，是目前常用的技術(shù)。根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標準，可以將基因擴增儀分為普通基因擴增儀，梯度基因擴增儀，原位基因擴增儀，實時熒光定量基因擴增儀四類。

普通基因擴增儀

　　一般把一次PCR擴增擴增只能運行一個特定退火溫度的基因擴增儀，叫傳統(tǒng)基因擴增儀，也叫普通基因擴增儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。

　　普通基因擴增儀主要是做簡單的，對目的基因退火溫度的擴增。可用于科研研究，教學，醫(yī)學臨床，檢驗檢疫等機構(gòu)。

梯度基因擴增儀

　　一次性PCR擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度基因擴增儀。因為被擴增的不同的DNApian段其Z適合的退火溫度不同，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增，從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的Z適合退火溫度進行有效的擴增。

　　基因擴增儀主要用來研究未知DNA退火溫度的擴增，這樣既節(jié)約時間，也節(jié)約經(jīng)費。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當做普通基因擴增儀用。正真的梯度基因擴增儀，是每一排管都有精確的加熱控溫探頭，2009年為止只有美國ABI公司可以做到。其他的基因擴增儀都是從兩頭的熱傳遞來設(shè)計控溫。目前，梯度基因擴增儀多應(yīng)用于科研、教學機構(gòu)。

原位基因擴增儀

　　原位基因擴增儀是用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀。如病原基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。可保持細胞或組織的完整性，使基因擴增反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA，還能標出靶序列在細胞內(nèi)的位置。于分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有著重大的實用價值。

實時熒光定量基因擴增儀

　　實時熒光定量基因擴增儀是在普通基因擴增儀設(shè)計基礎(chǔ)上，增加熒光信號激發(fā)和采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)，形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同，在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)，得出量化的實時結(jié)果輸出。

　　實時熒光定量基因擴增儀有單通道，雙通道和多通道之分。當只用一種熒光探針標記的時候，選用單通道;有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產(chǎn)物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，實現(xiàn)一次檢測多種目的基因的功能。

　　實時熒光定量基因擴增儀主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。

不同類型基因擴增儀的區(qū)別

　　基因擴增儀一般有四種類型，分別是普通基因擴增儀，梯度基因擴增儀，實時熒光定量基因擴增儀和原位基因擴增儀。這四種基因擴增儀的一般原理有相似的地方，但在結(jié)構(gòu)和配件方面還存在一些差異。

　　1、普通基因擴增儀：

　　由主機，加熱模塊，PCR管樣品基座，熱蓋，控制軟件組成。

　　2、梯度基因擴增儀：

　　除具有普通基因擴增儀的結(jié)構(gòu)外，還具有特殊的梯度模塊，可實現(xiàn)對梯度溫度和梯度時間等參數(shù)的調(diào)整。因此可以在一次實驗中對不同樣品設(shè)置不同的退火溫度和退火時間，從而可在短時間內(nèi)對PCR實驗條件進行優(yōu)化，提高PCR科研效率。

　　3、實時熒光定量基因擴增儀：

　　在普通基因擴增儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)。熒光檢測系統(tǒng)主要包括激發(fā)光源和檢測器。

　　激發(fā)光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發(fā)光二極管LED光源，前者可配多色濾光鏡實現(xiàn)不同激發(fā)波長，而單色發(fā)光二極管LED價格低、能耗少、壽命長，不過因為是單色，需要不同的LED才能更好地實現(xiàn)不同激發(fā)波長。

　　監(jiān)測系統(tǒng)有超低溫CCD成像系統(tǒng)和PMT光電倍增管，前者可以一次對多點成像，后者靈敏度高但一次只能掃描一個樣品，需要通過逐個掃描實現(xiàn)多樣品檢測，對于大量樣品來說需要較長的時間。

　　4、原位基因擴增儀：

　　和普通基因擴增儀相比，用玻片代替了PCR管，其反應(yīng)過程是在載玻片的平面上進行的。