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融合細胞的選擇方法

更新時間:2025-10-20 18:35:25 類型: 閱讀量:3456
導讀:在自發或人工誘導下,兩個細胞或原生質體融合,使得一個雜種細胞形成,即是細胞融合。細胞融合使得異核體形成、通過細胞有絲分裂異核體進行核融合、zui終使得單核的雜種細胞形成為細胞融合的基本過程。

在自發或人工誘導下,兩個細胞或原生質體融合,使得一個雜種細胞形成,即是細胞融合(cell fusion)。細胞融合使得異核體(heterokaryon)形成、通過細胞有絲分裂異核體進行核融合、Z終使得單核的雜種細胞形成為細胞融合的基本過程。作為一種實驗方法,在單克隆抗體的制備,膜蛋白的研究方面,細胞融合應用非常廣泛。


融合細胞的選擇

融合產物不同,其在培養條件下會存在差異。同源融合的原生質體以及未融合的原生質體對培養條件可以比較快的適應,而生成發育。由于異源融合體一般發育緩慢,優勢生長的親本原生質體融合細胞會對其有所YZ,發育成雜種的概率偏低。所以需要通過培養和篩選,將需要的雜種細胞分離出來,將不需要的細胞除去,從而使融合細胞的選擇問題得以解決。


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尚無篩選雜種細胞的特定規律可循,具體的篩選方案和選擇體系需要針對不同對象來設計和制定。只允許雜種細胞生長或者對于雜種細胞優先選擇,來對親本細胞進行淘汰。


雜種細胞通過雙親細胞形態和色澤上的不同來進行識別為Z簡單的選擇方法,然而大多數的選擇是以細胞生理遺傳上的特性為依據。雜種細胞篩選較為常用的方法如下:


1、生長特性篩選

雜種細胞通過原生質體對培養基成分要求與反應的不同來進行選擇。


2、物理特性篩選

雜種細胞通過親本的原生質體大小、顏色、漂浮密度及電泳遷移率形成的愈傷組織的不同來選擇。


3、遺傳互補篩選

一親本的缺陷利用另外一親本貢獻一個功能正常等位基因來進行糾正,從而通過雜種細胞有正常功能表現的原理來對雜種細胞進行選擇。


4、抗體互補篩選

雜種細胞通過親本原生質體對抗生素、除草劑及其他毒性物質抗性差異來選擇,這種方法也能夠用于抗藥性有差異或抗性突變體。


5、其他方法

單個異核體也可以采用顯微操作技術分離出來進行培養。由于若為融合細胞,那么與雙親本不同的熒光標記就必須具備,因此,采用無毒的熒光素標記雙親原生質體這一普遍適用的方法被科學家發明出來。融合后融合細胞利用一種電子熒光激活選擇器來自動分類和選擇。


以上方法中利用選擇性培養基是一個很常用的雜種細胞選擇方法。


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