spr傳感化學技術

表面等離子共振技術，簡稱SPR，是從20世紀90年代發(fā)展起來的一種新技術，對在生物傳感芯片（biosensor chip）上配位體與分析物之間的相互作用情況的檢測是SPR應用原理。在各個領域得到廣泛地應用。

親和力捕獲表面組氨酸標簽蛋白

(HisCap和HisHiCap芯片)

HisCap芯片附著蛋白質的方式是采用了NTA-Ni技術。在這種技術中,由表面附著的NTA-Ni復合物和感興趣蛋白質的組氨酸的側鏈咪唑共同協(xié)作。這種技術十分有效的前提即是蛋白質的組氨酸需要充足。6個組氨酸為典型的組氨酸標標記，然而3個也行。

HisCap芯片為His-tagged蛋白的直接固定提供了一個Z便利的手段，也對任何帶有足夠數(shù)量的組氨酸殘基的蛋白十分適用。

聚組氨酸標簽蛋白的固定因HisCap芯片而可逆和穩(wěn)定，HisCap芯片也能夠保證更加簡單地進行表面等離子共振（SPR）實驗。

連有固定蛋白的基線十分穩(wěn)定，能夠做動力學分析實驗。

HisCap芯片優(yōu)勢：

1.如果條件溫和，能夠再生芯片。比如咪唑以及EDTA。

2.HisCap芯片能夠重復使用。

3.在實驗室的重組蛋白工作中，His-tagging是一個長期建立的標準技術。

4.利用HisCap芯片可以使捕獲的His-tagged蛋白產生的基線穩(wěn)定。

胺基偶聯(lián)固定

（COOH1和COOH2芯片）

因為胺基基團非常普遍，因此對于絕大部分的生物分子來說，通過胺基偶聯(lián)固定配體均適用。到目前為止，只要使用該方法隨機固定配體，一般都可以獲得高質量的結果。所以直接固定特定位點一般沒有必要。

使用NHS和EDC含水混合物對羧基活化，使得胺基活性脂產生為Z常使用用的方法。該流程具有如下優(yōu)點：

1.生物分子不需要在惡劣的條件中暴露。

2.固定的條件非常容易控制，能夠避免和表面過度交叉連鎖。

3.用于制備化學試劑。凍存數(shù)月

4.不需要標記，也不需要衍生作用，就能夠對絕大多數(shù)生物分子進行固定。

5.有大量穩(wěn)定的共價鍵產生，從而避免了配體從表面濾掉。

6.在廣泛的pH值中，十分有效果。