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分子生物學實驗基礎知識
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本文由 浙江托普云農科技股份有限公司 整理匯編
2024-09-24 02:33 389閱讀次數
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分子生物學實驗基礎知識
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- PCR相關試劑產品編號產品名稱規格目錄價優惠價PC0101TaqDNAPolymerase250U10050PC0102500U180100 PC01031000U350200PC01043000U650450TaqDNAPolymerase無外源核酸酶和細菌DNA污染,穩定性好,特異性強,適用于常規PCR擴增。一般用于<6kb的對保真度要求不高的DNA產物的擴增、引物延伸、序列測定、DNA平末端加A等。PC0201RedTaqDNAPolymerase250U11050PC02021000U390200PC02033000U990450RedTaq由TaqDNAPolymerase和RedDye及擴增助劑等組成。亮麗的紅色彩,非常易于區分是否已經加入Taq酶。活性強、產量高、特異性好,產物無需加LoadingBuffer,可直接加樣電泳。下游應用:PCR法擴增DNA(陽性克隆的篩選以及克隆的檢測,基因的表達分析等);大量樣品的PCR檢測。PC0301TaqPlusDNAPolymerse250U13060PC0302500U230100 PC03033000U1200450 TaqPlusDNAPolymerse是Taq和PfuDNA聚合酶的混合物,具備擴增效率高,錯配率低的特點。與TaqDNA聚合酶相比,TaqPlusDNA聚合酶具有擴增長度增加,保真度好等優點;與PfuDNA聚合酶相比,具有擴增速度快,反應效率高的優勢。常用于一些保真度高,結構復雜的模板(如GC含量高,有二級結構等)的擴增,大多數情況下可替代TaqDNA聚合酶。PC0601LATaqDNAPolymerase250U16080PC0602500U300150PC06033000U1400700LA(LongandAccurate)TaqDNAPolymerase具備擴增效率高,保真性強的特點。配備GX擴增Buffer和PCR增強劑,可適應不同模板的擴增。適合于保真度要求高的長片段以及一些復雜模板(如含二級結構,富含GC序列和重復序列等)的擴增,如構建基因圖譜,測序及分子遺傳學研究等。PC0401PfuDNAPolymerase250U16080PC0402500U300150PC04033000U1400700由于Pfu有3'-5'的外切酶活性,它能糾正DNA擴增過程中產生的錯誤,而傳統的TaqDNA聚合酶卻不能。PfuDNA聚合酶比普通TaqDNA聚合酶熱穩定性更好,95℃一小時仍保持90%以上活性。Pfu用于DNA的高保真擴增,如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內基因點突變的分析(SNP)和末端補平等。PC0501Red-PfuDNAPolymerase250U200100PC0502500U350175PC05033000U1500750RedPfu由PfuDNAPolymerase和RedDye及擴增助劑等組成。亮麗的紅色彩,非常易于區分是否已經加入Pfu酶。擴增產物無需LoadingBuffer,可直接加樣電泳。PfuDNA聚合酶有3-5端外切酶活性,DNA擴增時具有校正功能。PCR產物為平端,無單個A。RedPfu用于DNA的高保真擴增,如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內基因點突變的分析(SNP)和末端補平等。PC10012×TaqPCRMasterMix0.5ml8540PC10021ml16070PC10035ml640302xTaqPCRMasterMix包含TaqDNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應增強劑和優化劑以及穩定劑,濃度為2x。一般用于<6kb的對保真度要求不高的DNA產物的擴增、引物延伸、序列測定、DNA平末端加A等。PC17012×PfuPCRMasterMix0.5ml10580PC17025ml900700 2xPfuPCRMasterMix包含PfuDNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應增強劑和優化劑以及穩定劑,濃度為2x。用于DNA的高保真擴增,如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內基因點突變的分析(SNP)和末端補平等。PC24012×LATaqPCRMasterMix0.5ml10560PC24025ml9005502xLATaqPCRMasterMix包含LATaqDNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應增強劑和優化劑以及穩定劑,濃度為2x。適用于高特異性PCR反應,復雜模板如GC含量高(>60%),有二級結構等的擴增和大規?;驒z測。PC1201快速PCR擴增試劑盒200U180140PC12021000U800600PC12033000U20001500本試劑盒已經包含了PCR擴增使用的各種試劑,便于客戶配套使用??焖俸啽悖`敏度高,特異性強,穩定性好。使用本制品擴增得到的PCR產物的3'端附有一個A堿基,可直接克隆于T-Vector中。PC1301長片段PCR擴增試劑盒100次280220 PC1302500次1100800 本試劑盒所用的酶是LATaqDNA聚合酶,這種酶能以染色體和其他細胞器的DNA為模板GX進行PCR反應。在人的染色體上可以擴增出27kb的DNA片段,而以1DNA為模板則可以擴增出40kb的片段。PC1401高保真PCR擴增試劑盒100次280220 PC1402500次900720 本試劑盒提供DNA高保真擴增所需要的基本試劑。DNA擴增時,用戶需要自行準備模板和擴增所需要的引物。主要用于對保真度要求非常高的DNA擴增。PC1501PCRenhancer100μl3530PC1502500μl9575PCR增強劑能與所有的耐熱DNA聚合酶共同作用促進許多DNA模板的有效擴增,增加PCR反應的靈敏度和特異性。PC2201dNTPMixtureeach10mMsolution0.5ml8060PC2301dNTPMixtureeach2.5mMsolution0.5ml3020[詳細]
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2018-11-14 10:00
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2018-08-24 10:00
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2008-06-30 00:00
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2007-07-23 00:00
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2011-10-13 00:00
其它
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恒電位儀基礎知識
- IntroductionApotentiostatisanelectronicinstrumentthatcontrolsthevoltagedifferencebetweenaWorkingElectrodeandaReferenceElectrode.Bothelectrodesarecontainedinanelectrochemicalcell.ThepotentiostatimplementsthiscontrolbyinjectingcurrentintothecellthroughanAuxiliaryorCounterelectrode.Inalmostallapplications,thepotentiostatmeasuresthecurrentflowbetweentheWorkingandCounterelectrodes.Thecontrolledvariableinapotentiostatisthecellpotentialandthemeasuredvariableisthecellcurrent.[詳細]
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2018-08-30 10:00
產品樣冊
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免疫組化基礎知識
- 免疫組織化學的概念:免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學。免疫組化實驗所用的抗體有哪些?免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。免疫組化實驗所用的組織和細胞標本有哪些?實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標本Z常用、Z基本的方法,對于組織形態保存好,且能作連續切片,有利于各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對組織內抗原暴露有一定的影響,但可進行抗原修復,是免疫組化中的組織標本制作方法。石蠟切片為什么要做抗原修復?有哪些方法?石蠟切片標本均用甲醛固定,使得細胞內抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發生交聯而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進行IHC染色時,需要先進行抗原修復或暴露,即將固定時分子之間所形成的交聯破壞,而恢復抗原的原有空間形態。常用的抗原修法有微波修復法,高壓加熱法,酶消化法,水煮加熱法等,常用的修復液是pH6.0的0.01mol/L的檸檬酸鹽緩沖液。免疫組化常用的染色方法有哪些?根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素抗生物素染色法Z常用??贵w交叉反應的原因:指抗體除與其相應的抗原發生特異性反應外還與其它抗原發生反應。產生的原因有以下幾個方面:1.抗原特異性指用于免疫動物的抗原性物質中含有多種抗原分子,它引起動物產生針對多種抗原分子特異性的相應抗體。任何其它物質只要含有一種或多種與上述物質相同的抗原分子,必將與上述多特異性的抗血清發生交叉反應。2.共同決定簇即兩種抗原分子中都含有相同的抗原決定簇。3.決定簇相似,兩種不同的抗原決定簇,如果結構大致相同,由于空間構象關系,某一決定簇的相應抗體可以與大致相同的決定簇發生交叉反應。當然抗原一抗體之間構象相似時的結合力小于吻合時的結合力。多抗和單抗特性比較:1.均一性。一種單抗中,每個抗體的化學結構和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。即單抗是一種純度很高的均一抗體。而從不同動物,不同時期所得到的多抗,各有不同的化學組成。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。2.穩定性。單抗的穩定較差,對PH變化敏感,對熱不穩定,提純過程中易變性,而多抗的穩定性則較好。3.特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進行血清學反應時,特異性強,敏感性高,一般不發生交叉反應。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結合,所以特異性較差,較易引起交叉反應。4.重復性。單抗的重復性好,而多抗每批都不一樣。5.沉淀反應。多抗由于與抗原多價結合容易形成網絡樣沉淀,而單抗只與抗原結合產生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物??贵w的保存:抗體儲存容器應由不吸附蛋白質的材料制成,常用的有聚丙烯,聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如儲存的抗體中蛋白濃度很低(10-100mg/L),就應另加隔離蛋白以減少容器對抗體蛋白的吸附,隔離蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。絕大多數已稀釋的抗體應存在4℃-8℃條件下,以免凍融對抗體蛋白產生有害效應??贵w原液和已分離的免疫球蛋白組分應保存于-20℃條件下,并避免反復凍融。冷凍的抗體溶液應置于室溫中緩慢地解凍,應避免用高溫快速解凍。被細菌污染的抗體常會出現假陽性結果,應將污染的抗體溶液及其他試劑棄之。為防止細菌污染,可于抗體溶液中加入0.01%疊氮鈉。抗體經真空冷凍干燥后置-20℃以下可保存3-5年。保存稀釋后的單抗應加入0.1%疊氮鈉濃度。大多數稀釋抗體可進行冷凍保存,少數抗體可能會丟失抗原活性。大多數單抗,只要蛋白濃度適當,可在4℃下保存數月。[詳細]
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2018-09-27 10:00
產品樣冊
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GMP基礎知識
- 1、GMP的名詞來源和中文含意是什么?
答:GMP的出現和震驚世界的沙立度胺(thalidomide即反應停)藥害事件有關,沙立度胺是一種鎮靜藥。20世紀50年代后期原聯邦德國格侖南蘇制藥廠生產,當時用于ZL孕婦妊娠嘔吐,出售后的6年間,先后在聯邦德國、日本等28個國家,造成12000多例畸形胎兒,1300例多發性神經炎。美國當時沒有批準進口“反應?!保旧蠜]有受到影響,但此次事件的嚴重后果在美國引起不安,美國公眾強烈關注藥品監督和藥品法規,導致了國會對《食品、藥品和化妝品法》和重大修改。1962年修訂案在以下三個方面明顯加強了藥品法的執行力度:
⑴要求制藥企業不僅要證明藥品的有效性,而且要證明藥品的安全性。
⑵要求制藥企業要向FDA報告藥品的不良反應。
⑶要求制藥企業實施藥品生產和質量管理規范。
1963年,美國國會頒布了世界上DY部GMP。
GMP是英文GoodManufacturingPractice的縮寫。直譯為“優良的生產實踐”,由于Manufacture一詞包含生產和質量管理雙重含意,加之,在國際上GMP已成為藥品生產和質量管理的基本準則,是一套系統的、科學的管理制度,所[詳細]
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2021-06-01 17:23
標準
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反應釜基礎知識
- 反應釜基礎知識[詳細]
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2024-09-22 10:42
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烘箱基礎知識
- 烘箱基礎知識[詳細]
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2024-09-29 05:53
產品樣冊
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分子生物學實驗室的器材配置
- 分子生物學實驗室的器材配置[詳細]
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2010-05-21 00:00
報價單
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生物化學與分子生物學的概述
- 生物化學與分子生物學的概述生物化學與分子生物學既是生命科學的基礎,又是生命科學的前沿。生物化學與分子生物學在分子水平探討生命的本質,即研究生物體的分子結構與功能、物質代謝與調節。生物化學與分子生物學是目前自然科學中進展Z迅速、Z具活力的前沿領域。作為生命存在的基礎,生物分子的結構、功能、數量及存在部位的異常和一些重要的生化反應或過程紊亂均可導致疾病的發生。所以說,生物化學與分子生物學在基礎醫學和臨床醫學中起著重要作用。上海易利生物致力于生命科學領域的研究,研發并提供:ELISA試劑盒,生物試劑,抗體等科研產品和服務,以滿足人類對生命科學研究之日益增長的需要,促進社會的發展。隨著現代科學的迅速發展,生物化學與分子生物學的課程已經從以物質代謝為ZX的傳統教學模式轉移到了以基因信息傳遞以ZX的現代分子生物學的新型知識框架。為此,生物化學的教學除了交待物質代謝之外,還應ZD地介紹分子生物學的基本知識和實驗技能,介紹生物大分子的結構與功能的關系,基因信息傳遞。同時聯系臨床實踐,介紹如何在分子水平上認識、診斷和ZL人類疾病。[詳細]
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2018-12-30 10:00
產品樣冊
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微生物鑒定的分子生物學方法舉例
- 微生物鑒定的分子生物學方法舉例[詳細]
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2024-09-18 02:59
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