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資料庫
畢赤酵母表達系統說明書
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2018-09-29 10:02 1855閱讀次數
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畢赤酵母表達系統說明書YoucanputthepowerofP.pastorisintoyourlaboratorywithacompletePichiaExpressionKitorwithindividualPichiaexpressionvectors.ThreePichiaExpressionKitsareavailable,eachofwhichincludesvectors,P.pastorisstrains,reagentsfortransformation,sequencingprimers,media,andacomprehensivemanual(Table3).Inaddition,thepPICZ,pGAPZ,andpPIC6vectorsareavailableseparately(seeinsertfororderinginformation).ChoosethekitorvectorthatbestmeetsyourresearchneedsandtakeadvantageoftheprovenstrengthofP.pastoris.Table3Pichiaexpressionkitcomponents.EasySelectPichiaExpressionKitMulti-CopyPichiaExpressionKitOriginalPichiaExpressionKitVectorspPICZA,B,C(20geach)pPICZαA,B,C(20geach)pPIC9K(20g)pPIC3.5K(20g)pAO815(20g)pPIC9(10g)pPIC3.5(10g)pHIL-D2(10g)pHIL-S1(10g)StrainsX-33(Mut+,His+)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/pPICZ/lacZ(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)TransformationreagentsPichiaEasyCompKit(120transformations)SpheroplastModule(50transformations)SpheroplastModule(50transformations)SequencingprimersOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorMediaandsupplementsYPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)Zeocin(250mg)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)上海起福生物科技有限公司聯系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業QQ:4006551678網址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區繡川路561號1102室
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畢赤酵母表達系統說明書
- 畢赤酵母表達系統說明書YoucanputthepowerofP.pastorisintoyourlaboratorywithacompletePichiaExpressionKitorwithindividualPichiaexpressionvectors.ThreePichiaExpressionKitsareavailable,eachofwhichincludesvectors,P.pastorisstrains,reagentsfortransformation,sequencingprimers,media,andacomprehensivemanual(Table3).Inaddition,thepPICZ,pGAPZ,andpPIC6vectorsareavailableseparately(seeinsertfororderinginformation).ChoosethekitorvectorthatbestmeetsyourresearchneedsandtakeadvantageoftheprovenstrengthofP.pastoris.Table3Pichiaexpressionkitcomponents.EasySelectPichiaExpressionKitMulti-CopyPichiaExpressionKitOriginalPichiaExpressionKitVectorspPICZA,B,C(20geach)pPICZαA,B,C(20geach)pPIC9K(20g)pPIC3.5K(20g)pAO815(20g)pPIC9(10g)pPIC3.5(10g)pHIL-D2(10g)pHIL-S1(10g)StrainsX-33(Mut+,His+)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/pPICZ/lacZ(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)GS115(Mut+)KM71(MutS)GS115/β-gal(control)GS115/albumin(control)TransformationreagentsPichiaEasyCompKit(120transformations)SpheroplastModule(50transformations)SpheroplastModule(50transformations)SequencingprimersOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorOX13AOX1α-factorMediaandsupplementsYPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)Zeocin(250mg)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)YPbasemedium(2pouches)*YPbaseagar(2pouches)*YeastNitrogenBase(1pouch)上海起福生物科技有限公司聯系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業QQ:4006551678網址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區繡川路561號1102室[詳細]
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2018-09-29 10:02
產品樣冊
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畢氏酵母電轉化法
- 畢氏酵母電轉化法[詳細]
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2013-11-01 00:00
專利
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Clontech酵母雙雜交系統 pCL1說明書
- MATCHMAKERGAL4Two-HybridVectorsHandbookpCL1型號載體名稱出品公司載體用途VJC0484pCL1Clontech酵母雙雜交系統產品參數:測序引物:CMV-F載體抗性:氨芐青霉素(Ampicillin)載體描述:pCL1isapositivecontrolplasmidthatencodesthefulllength,wild-typeGAL4protein.TheGAL4proteinactivatesreportergenesunderthecontrolofaGAL4-responsiveelement(UASG).Thus,pCL1isusedasapositivecontrolforthetranscriptionassayinGAL4-basedMATCHMAKERTwo-HybridSystems.ThisvectorisaderivativeofYCp50referencedinFields&Song,1989.pCL1hasnotbeensequenced.質粒圖譜:[詳細]
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2018-09-29 10:03
產品樣冊
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Clontech 酵母雙雜交系統 pGBKT7說明書
- Clontech酵母雙雜交系統pGBKT7,酵母雙雜交系統pGBKT7,ClontechpGBKT7pGBKT7產品參數:MammalianSelection:TRP1(HIS3selection)載體抗性:卡那霉素(Kanamycin)說明書:質粒圖譜:[詳細]
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2018-09-29 10:03
產品樣冊
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Clontech pBridge酵母三雜交系統說明書
- ClontechpBridge酵母三雜交系統說明書載體描述:pBridgeexpressestwoproteins:aDNA-bindingdomainfusion,andanadditionalprotein.pBridgethusallowsestablishmentofthree-hybridsystemswhenusedincombinationwithanactivationdomainfusionvectorandyeaststrainsfromanyofClontech'sGAL4-basedtwo-hybridsystems,includingMatchmakerGold.ThisvectorgeneratesahybridproteinthatcontainsthesequencesfortheGAL4DNA-bindingdomain(DNA-BD)andthesequenceclonedintoMCSI.ThefusionproteinisexpressedinyeasthostcellsfromtheconstitutiveADH1promoter;transcriptionisterminatedattheADH1transcriptionterminationsignal.Thehybridproteinistargetedtotheyeastnucleusbynuclearlocalizationsequences(NLS)thatareanintrinsicpartoftheGAL4DNA-BD.AnadditionalgeneofinterestcanbeclonedintoMCSIIwhichislocateddownstreamofanHAepitopeandasecondNLS.TheresultingfusionproteinisconditionallyexpressedfromtheMet25promoterinresponsetomethioninelevelsinthemedium;i.e.,itisrepressedinthepresenceof1mMmethionineandexpressedintheabsenceofmethionine.質粒圖譜:[詳細]
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2018-09-29 10:03
產品樣冊
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酵母單雜交系統Clontech pHis2說明書
- 酵母單雜交系統ClontechpHis2說明書DescriptionpHIS2isareportervectorthatcanbeusedinyeastone-hybridassaystoidentifyandcharacterizeDNA-bindingproteins.ThevectorwasspecificallydesignedforusewiththeBDMatchmakerOne-HybridLibraryConstruction&ScreeningKit(#K1617-1).ItcontainsaHIS3nutritionalreportergene,locateddownstreamofamultiplecloningsite(MCS)andtheminimalpromoteroftheHIS3locus(PminHIS3).Cis-actingDNAsequences,orDNAtargetelements,canbeinsertedintotheMCSandusedasbaitstoscreenGAL4AD/cDNAfusionlibrariesforproteinsthatinteractwiththetargetsequence.Aprotein-DNA(orone-hybrid)interactioncanbedetectedbyperformingtheassayinayeaststrainsuchasY187thatisauxotrophicforhistidine.Positiveone-hybridinteractionsdriveexpressionoftheHIS3reportergene,whichenablesthehostcelltogrowonhistidine-deficientmedia.Intheabsenceofactivation,theconstitutiveHIS3expressionfromPminHIS3isverylow.Duringlibraryscreening,theleakyexpressionofHIS3iscontrolledbyadding3-amino-1,2,4-triazole(3-AT)tothemedium.Theconcentrationof3-ATneededtofullysuppressleakyHIS3expressionmustbedeterminedempiricallyforeachDNAtargetelement.pHIS2canbemaintainedinbothyeastandbacteria.Itcontainsanautonomousreplicationsequence(ARS4)andTRP1nutritionalmarkerforreplicationandselectioninyeast(1,2);itcontainsaColE1originandakanamycinresistancegene(Kanr)forpropagationandselectioninE.coli.ThecentromericsequenceCEN6ensurespropersegregationoftheplasmidduringcelldivisioninyeast(1,2).UseTousepHIS2inaone-hybridassay,cloneoneormorecopiesofacis-actingDNAtargetsequenceintotheMCS.ThenintroducetheplasmidintocompetentyeastcellsusingthetransformationprotocolintheBDMatchmakerLibraryConstruction&ScreeningKitsUserManual(PT3529-1).IncontrasttotheoriginalBDMatchmakerOne-HybridSystem,thisreportervectordoesnotneedtobeintegratedintotheyeastgenome.Instead,itismaintainedasanepisomethroughouttheassay.InsertingyourtargetelementmayalterthelevelofbackgroundHIS3expression.Therefore,constructs首ldbetestedforbackground(leaky)HIS3expressionbeforeyoustartaone-hybridanalysis.BackgroundgrowthduetoleakyHIS3expressioniscontrolledbyadding3-ATtotheselectionmedium,asdescribedintheUserManual(PT3529-1).LocationofFeaturesMultiplecloningsites:141HIS3gene:152811FragmentcontainingtheHIS33'UTR&Terminationsequence:8121446TRP1gene:28553529FragmentcontainingtheColE1E.colioriginofreplication:41654615Kanamycin-resistancegene:56054811CEN6/ARS4sequences:62545737[詳細]
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2018-09-29 10:03
產品樣冊
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Invitrogen Vectors:pIND,pVgRxR 蛻皮激素誘導表達系統說明書
- 蛻皮激素誘導表達系統InvitrogenVectors:pIND,pVgRxR產品參數:MammalianSelection:Zeocin載體抗性:博萊霉素(Zeocin)載體描述:蛻皮激素誘導系統(Ecdysone-InducibleSystem)蛻皮激素誘導系統是用來在哺乳動物細胞中對目的基因進行依賴劑量的可調控表達,該系統和其它表達系統相比Zda的區別是它的極ng確調控表達機制,使它能夠在哺乳動物細胞中進行檢測不到的基礎表達和超過200倍的誘導表達。蛻皮激素誘導系統包含兩個載體:pVgRXR和一個基于plND的誘導表達載體,pVgRXR可組成型表達人視黃酸受體(retenoldXreceptor,RXR)和一個修飾過的果蠅蛻皮激素受體(DrosophiaEcdysoneReceptor,VgEcR),這兩種受體亞單位互相作用形成有功能的蛻皮激素受體。蛻皮激素誘導系統具有下述特點:可調節性表達:ponasteroneA(松甾酮A)或murlsteroneA(幕黎甾酮A)劑量依賴性的誘導,使表達具有彈性。Z小限度的基礎表達:經過特別優化的pVgRXR和plND系列誘導表達載體,消除了與哺乳動物調控分子的非特異性相互作用。高誘導能力:pVgRXR和plND系列誘導表達載體使用了特別設計,以使基因誘導達到Zda。pVgRXR包含有Zeocin抗性基因,可以快速篩選能夠穩定表達異源二聚體受體分子的細胞系。每個基于plND的誘導表達載體都包含有第二個藥物抗性基因,以得到雙倍穩定的細胞系。誘導試劑不影響哺乳動物的正常生理活動,所以不會產生多效性影響。質粒圖譜:質粒圖譜:[詳細]
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2018-09-29 10:03
產品樣冊
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Simon全自動蛋白質表達分析系統
- Simon全自動蛋白質表達分析系統[詳細]
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2024-09-28 02:06
專利
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LacSwith II哺乳動物誘導表達系統 (pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI)說明書
- StratageneLacSwithII哺乳動物誘導表達系統StratageneLacSwitchIIInducibleMammalianExpressionSystemStratageneVectors:pOPRSVI,pOPI3CAT,pCMVLacI產品參數:MammalianSelection:G418,neo載體抗性:氨芐青霉素(Ampicillin)載體描述:ImprovedSystemTheimprovedLacSwitch?IIinduciblemammalianexpressionsystemconsistsof3vectors:pOPI3CATvectorfromtheoriginalLacSwitchsystemandtwonewvectors,pCMVLacIandpOPRSVI/MCS,thatdramaticallyimprovethesystem’sperformanceandversatility.Lacrepressorprotein,producedfromthepCMVLacIvector,blockstranscriptionbybindingtheLacrepressorproteintoaspecificDNAsequence(theoperator)inthepOPI3CATandpOPRSVI/MCSvectors.IPTG,whichhasnoadverseeffectineukaryoticcells,decreasesthebindingaffinityoftheLacrepressorproteintotheoperatorsequences,triggeringtranscriptionandexpressionoftheinsertedgene.TheLacSwitchIIsystemallowsinductionofthegeneofinterestwithin4-8hours.TightRepressionThenewpCMVLacIvectorreplacesthep3’SSvectorfromtheoriginalsystem.ThepCMVLacIvectorprovidesgreaterrepressionofthegeneofinterestduetotheincreasedstrengthoftheCMVpromoter.HighexpressionofthelacIgeneprovides2-to10-foldtighterrepressionofthegeneofinterestthantheoriginalp3’SSvector.Anuclearlocalizationsequence(NLS)directsexpressionofLacrepressortothenucleus.DirectionalInsertionoftheGeneofInterestTofacilitatedirectionalcloning,themultiplecloningsitefrompBluescript?IISKwasinsertedintopOPRSVI.TheresultingpOPRSVI/MCSvectorpermitsdirectionalinsertionofthegeneofinterest,decreasingthetimerequiredforscreening.ThepresenceofT3andT7promotersoneitherendoftheMCSinthepOPRSVI/MCSvectorallowseasysequencingandverificationofpositiveinsertsusingT3andT7primers.RemovaloftheRSVPromoterThepOPI3CAToperatorvectorisincludedintheLacSwitchIIsystemforreplacingtheRSV-LTRpromoterwithapromoterofinterest.ThisvectorcontainsthreeoperatorsintheintronanduniquerestrictionsitesforremovaloftheRSVpromoter.[詳細]
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2018-09-29 10:03
產品樣冊
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赤羽病試劑盒檢測說明書
- 赤羽病試劑盒檢測說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關液體樣本中赤羽病(AD)表達。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛赤羽病(AD)表達。用純化的牛赤羽?。ˋD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中赤羽?。ˋD)相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的赤羽病(AD)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛赤羽?。ˋD)的存在與否。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8陽性對照0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9陰性對照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。計算和結果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為牛赤羽病(AD)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為牛赤羽?。ˋD)陽性。注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-10-09 10:00
產品樣冊
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義翹講堂《選對系統,高效表達:蛋白表達系統特性分析 × 高頻問題一站式解答》
- 義翹講堂《選對系統,高效表達:蛋白表達系統特性分析 × 高頻問題一站式解答》——包含蛋白表達系統特性分析、各類蛋白表達平臺技術路線、蛋白表達系統的選擇策略、重組蛋白表達優化案例……[詳細]
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2026-01-22 10:39
課件
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酵母雙雜交系統的建立與發展
- 酵母雙雜交系統的建立與發展[詳細]
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2015-04-01 00:00
其它
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Milo單細胞蛋白質表達定量分析系統產品樣冊
- Milo單細胞蛋白質表達定量分析系統產品樣冊[詳細]
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2024-09-19 11:18
報價單
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核糖核酸(酵母)
- 核糖核酸(酵母)[詳細]
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2024-09-28 21:49
選購指南
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玉米赤霉烯酮免疫親和柱說明書
- 資料名稱:玉米赤霉烯酮免疫親和柱說明書
適用產品:玉米赤霉烯酮免疫親和柱
正文語言:中文
文件編號:BP017-2
文件版本:2.0
文件格式:PDF
文件大?。?.9MB
內容簡介:玉米赤霉烯酮免疫親和柱適用于基質復雜、限量要求低的樣品中玉米赤霉烯酮檢測的凈化。可以進行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA等定量分析,適合谷物、食品和飼料等樣品。[詳細]
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2018-05-18 10:53
其它
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玉米赤霉烯酮ELISA試劑盒說明書
- 實驗原理本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)偶聯抗原,加入玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)標準品或樣品,游離玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)與微孔條上預包被的玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)偶聯抗原互相競爭抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)抗體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變為黃色,用酶標儀在450nm波長下進行檢測,吸光值與樣品中玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)含量成反比,通過標準曲線計算樣品中玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的含量。試劑盒組成1預包被的玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)偶聯抗原的可拆酶標板:1塊(12孔×8條)。2玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ng/ml,0.5ng/ml,2ng/ml,20ng/ml,200ng/ml,400ng/ml。3抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)抗體酶結合物:1瓶(6ml)。4顯色液A:1瓶(6ml)。5顯色液B:1瓶(6ml)。6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。9說明書一份。注意事項1使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。2不要使用過期試劑盒。3試劑盒使用前,將試劑恢復至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。4標準品中含有玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN),使用時應特別注意,操作時應帶手套。5終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結果。7不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實驗結果。8稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結果9混合試劑時應避免起泡。[詳細]
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2019-01-02 10:00
產品樣冊
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酵母質粒小量抽提試劑盒說明書
- 酵母質粒小量抽提試劑盒說明書[詳細]
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2014-12-12 00:00
標準
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酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒使用說明書
- 酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中酵母過氧化氫酶(CAT)水平。用純化的酵母過氧化氫酶(CAT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入過氧化氫酶(CAT),再與HRP標記的過氧化氫酶(CAT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫酶(CAT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中酵母過氧化氫酶(CAT)濃度。酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(16U/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。8U/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液4U/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液2U/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液1U/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液0.5U/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。酵母過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-23 10:00
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