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全風景LIMS簡介
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2024-09-18 18:06 596閱讀次數
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全風景LIMS簡介
- 全風景LIMS簡介[詳細]
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2024-09-18 18:06
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- 珀金埃爾默 KingsLIMS 在ZGLIMS 領域率先采用微服務架構,以技術優勢提供靈活強大的功能模塊自定義能力,讓KingsLIMS 完全適應您的實驗室流程,從而完善工作流程,保證合規性,提高流程效率,降低人為錯誤率。[詳細]
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2020-04-27 14:01
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2024-09-28 11:14
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2024-09-11 17:59
課件
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全血基因組DNA提取試劑盒簡介及說明書
- 全血基因組DNA提取試劑盒說明書貨號:D1800規格:50T/100T保存:室溫(15℃-25℃)干燥保存,復檢期12個月,2℃-8℃保存時間更長。試劑盒內容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2紅細胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脫液10ml20ml吸附柱50個100個收集管50個100個說明書1份1份產品簡介:本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統,提取全血基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司特有新型材料,能夠GX、專一吸附DNA,可Zda限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質量穩定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規操作,包括酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。操作步驟:使用前請先在漂洗液和溶液B中加入無水乙醇,加入休積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、樣品的處理(本產品適用于處理新鮮的或已經添加抗凝劑的0.lml-1ml血液樣品):a、在血液樣品中加入2-3倍體積的紅細胞裂解液,充分顛倒混勻,12000rpm離心1min,小心吸去上清,沉淀應為白色或淡紅色,如果裂解不徹底,可重復以上述步驟一次。向沉淀中加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。b、如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細胞為有核細胞,因此處理量為5-20u1,不需要再用紅細胞裂解液處理,直接加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。2、向懸浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分顛倒混勻,室溫放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分顛倒混勻,65℃水浴消化30-60min,消化期間可顛倒離心管混勻數次,直至樣品消化完全為止。4、加入2倍體積溶液B(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇),充分顛倒混勻,此時可能會出現絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入股附柱中,室溫放置2min,5、12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。8、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。9、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜ZY懸空滴加50-200ul經65℃水浴預熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。10、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm離心2min,即可得到高質量的基因組DNA。注意事項:1、本試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下可保存12個月,更長時間的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝劑有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因組DNA,可優先考慮使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因為用肝素抗凝的血液提取的基因組DNA進行PCR擴增時,有PCR擴增YZ現象。3、樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。4、如果試劑盒中的溶液出現沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響效果。5、絕大多數哺乳動物的全血如入全血中的紅細胞無核,故在提取基因組DNA時需去除不含DNA的無核紅細胞,以免影響紅細胞裂解和DNA釋放。如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細胞為有核細胞,因此處理量減少為5-20ul,不需要再用紅細胞裂解液來裂解紅細胞。6、洗脫緩沖液的體積**不少于50ul,體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。相關產品:D1850全血基因組DNA提取試劑系統E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE緩沖液T10505×TBE緩沖液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色劑(5000×)[詳細]
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