凝膠成像系統(tǒng)使用方法

　　凝膠成像系統(tǒng)是分子生物學(xué)常用儀器，在醫(yī)院臨床檢驗和科研開發(fā)中發(fā)揮著重要的輔助作用。其主要是對電泳后的瓊脂糖凝膠中的核酸在紫外燈管下的影像進(jìn)行采集，并進(jìn)行圖像保存與定性分析。

凝膠成像系統(tǒng)的操作說明

　　1、打開總電源開關(guān)(位于凝膠成像系統(tǒng)的右側(cè)的開關(guān))，電源指示燈亮;

　　2、將染色后的凝膠用水沖洗后，放在透射樣品臺正中，并關(guān)嚴(yán)暗箱抽屜;

　　3、雙擊電腦桌面上的快捷方式，錄入信息或者直接點擊“確認(rèn)”進(jìn)入軟件;

　　4、點擊打開拍攝程序;

　　5、凝膠成像系統(tǒng)出現(xiàn)以下界面表示安裝成功，可以開始成像操作。

　　參數(shù)設(shè)置：①對比度調(diào)整為：0;②對核酸成像：曝光時間1000~1500，增益20~30;③對蛋白成像：曝光時間500~800，增益20~30;

　　(1)打開反射白燈燈開關(guān)：①調(diào)節(jié)光圈大小，使畫面內(nèi)能觀察到圖像。②在計算機顯示屏上觀察凝膠是否已全部在顯示區(qū)域內(nèi)，如凝膠位置不在畫面ZY，請重新移動凝膠位置;如畫面內(nèi)未能將凝膠拍全，請調(diào)節(jié)變焦。

　　(2)關(guān)閉反射燈開關(guān)，打開透射燈開關(guān)。

　　6、觀察計算機上顯示的圖像，重新調(diào)節(jié)光圈大小注意避免圖像過亮出現(xiàn)光暈。調(diào)節(jié)焦距，使圖像清晰;

　　7、單擊右下角的，點擊掃描形成文件;退出掃描對話框，將直接進(jìn)入軟件分析，凝膠成像系統(tǒng)自動關(guān)閉所有光源，退出拍攝程序。

凝膠成像系統(tǒng)使用注意事項

　　1、注意開機順序，先開凝膠成像系統(tǒng)，再打開電腦進(jìn)入軟件。

　　2、紫外凝膠照相時要防止EB污染儀器，凝膠成像系統(tǒng)的門不能用污染的手套接觸，進(jìn)行軟件操作時同樣不能被污染的手套接觸。

　　3、在使用紫外光源照相的過程中，不可以打開凝膠成像系統(tǒng)前面板。

　　4、照相后經(jīng)廢膠取出，并用較軟的紙擦拭干凈。

　　5、調(diào)焦時要輕，動作不要劇烈。

　　6、環(huán)境電壓不穩(wěn)定時，請使用穩(wěn)壓電源。使用過程中如遇斷電，請及時將儀器電源關(guān)閉，直至重新來電。

　　7、使用時，請先打開凝膠成像系統(tǒng)的電源開關(guān)，再打開電腦開關(guān)并打開軟件。

　　8、保持觀測室內(nèi)環(huán)境干燥，及時將遺留在觀測板上的水或其他液體檫干(可使用軟質(zhì)紙，一般卷紙即可)。

　　9、觀測用EB(溴乙錠)染色的凝膠時，注意不要污染凝膠成像系統(tǒng)表面。千萬不要用手直接接觸凝膠，或戴著接觸過凝膠的手套去接觸凝膠成像系統(tǒng)的門和觀測臺的把手。

　　10、使用凝膠成像系統(tǒng)時，要將門及觀測臺關(guān)緊，否則將無法正常使用紫外燈。

　　11、盡可能不要將電腦連接到因特網(wǎng)或局域網(wǎng)上，同時在電腦上安裝殺毒軟件，做到專機專用。

　　12、較長時間不用凝膠成像系統(tǒng)時，將儀器用防塵罩蓋上。

　　13、為延長燈管的使用壽命，請觀測好凝膠后及時關(guān)閉光源。

凝膠成像系統(tǒng)的功能

　　由于多功能暗箱和計算機軟件功能的不斷發(fā)展，凝膠成像系統(tǒng)已可應(yīng)用于生命科學(xué)研究的多個方面。

　　一般功能：DNA/RNA、蛋白膠、DOT/Blue/Slot TLC板、ELISA、顯微照片、克隆計數(shù)及細(xì)胞計數(shù)等。

　　比色分析：考馬氏亮蘭、銀染等。

　　化學(xué)發(fā)光：AFLP、Western、Southern、Northem自顯影分析。

　　熒光分析：EtBr、SYBGreer、Gold、SYPRORED、Orange、Hoeches Blue、Rhodamine、多色熒光分析。

　　化學(xué)熒光分析：結(jié)合熒光與化學(xué)發(fā)光。

　　此外，多數(shù)暗箱上側(cè)只安裝白光燈，分析發(fā)熒光的TIC板時，由于玻璃不透紫外線，不能進(jìn)行測定，可以將玻璃板反放在黑板上，即薄層面向黑板，其發(fā)出熒光波長可見，能夠進(jìn)行測定。如果已經(jīng)用鋁板進(jìn)行薄層層析，那只能在暗箱上側(cè)安有紫外管燈的箱中進(jìn)行分析測定。