如何應對亞可見硅油液滴：生物制藥行業面臨的挑戰與策略（中）

四、臨床與安全性問題

硅油顆粒誘導的免疫原性尚未完全明確。許多報告表明，硅油顆粒與蛋白質相互作用存在潛在的免疫原性風險，其中蛋白質的結構和活性受到影響，使這些顆粒-蛋白質復合物具有免疫刺激特性。這導致在體外和體內免疫原性反應增加 。其中一些免疫原性反應似乎受到額外外部因素的影響，包括制劑組分（如表面活性劑）、裝置類型、給藥途徑和處理條件（即運輸條件），以及臨床使用——例如，注射器振搖。就硅油顆粒濃度而言，一項對小鼠的研究表明，含有高濃度硅油微滴（不含表面活性劑）的卵清蛋白制劑產生的免疫反應與含鋁佐劑的卵清蛋白制劑相似。這表明意外注入患者體內的高劑量硅油可能導致免疫反應增強。其他研究使用實際藥品和由運輸條件產生的硅油顆粒，顯示出與硅油顆粒相關的最小炎癥反應。使用體外和體內免疫模型系統，作者未發現存在表面活性劑聚山梨酯 80（組合產品中常用的表面活性劑）時免疫原性風險增加。Saggu 等人的研究也表明，硅油顆粒未顯著影響多種藥物、患者人群和給藥途徑的患者安全性特征，表明硅油顆粒的存在不會引起患者安全問題。玻璃體內應用也表明了“有癥狀的硅油顆粒”的可能性，例如飛蚊癥和炎癥，盡管這些表現并不一致且可能具有產品特異性——但這超出了本文的范圍。

硅油具有悠久的臨床使用歷史，并已根據現有數據發布了安全性評估。其毒理學特征仍存在空白，尤其是在評估其顆粒形式的影響時。這使得為硅油顆粒數量建立臨床閾值具有挑戰性，因為從患者安全角度進行毒理學特征和評估的是硅油顆粒中的硅油含量，而不是顆粒的數量或大小。如前所述，更復雜治 療藥物的持續開發創造了新的臨床場景，患者暴露于不同類型的顆粒。區分藥品中顆粒的類型將實現更具體的安全性評估，從而更好地了解患者實際暴露于不同顆粒及其組成的情況。

五、新興科學認識

亞可見顆粒分析是藥物開發的重要方面，該領域新技術正迅速涌現。通常，這些新興技術被用作正交表征工具，在藥典方法測量到高或變化的亞可見顆粒計數時，基于形態、折射率、密度等方面的差異來獲取特定顆粒群的額外信息。此外，許多這些儀器旨在作為開發研究的篩選工具，目標是高通量和小樣本量分析（微升而非毫升），并非用于批放行。其中一些儀器使用微流控技術或基于不同的物理原理檢測顆粒，導致分析的尺寸范圍與藥典光阻法不同。因此，在將此類數據與藥典方法生成的數據進行比較時需要仔細評估。一些這些技術及其階段適用性策略的討論可見于《治 療性蛋白質注射劑中亞可見微粒的測定》。以下簡要概述用于表征硅油顆粒的新興技術。

全息顯微鏡基于入射激光束與一小部分與粒子相互作用并被散射的激光束之間的干涉，從而產生全息圖。分析該全息圖可以提供大量信息，包括顆粒大小和形狀及其折射率。全息全表征能夠計數和測量約 0.5–10 μm 尺寸范圍內的顆粒。先前的工作表明，該方法能夠區分硅油顆粒與制劑中的其他顆粒，如蛋白質顆粒。

近年來另一個受到關注的高通量方法是背景化膜成像，該方法基于膜顯微鏡法。該方法使用 96 孔板，在樣品過濾前后對膜進行數字成像。然后通過從樣品圖像中減去背景圖像來可視化捕獲的顆粒。雖然硅油顆粒在樣品制備過程中被過濾膜去除，但捕獲的顆粒代表了非硅油顆粒群，可用于評估保留在過濾器上的亞可見顆粒群。

傳統的光譜方法，如拉曼或傅里葉變換紅外顯微鏡，通常用于顆粒的化學表征和鑒定。過去幾年，圖像分析的進步使得基于形態或大小進行（半）自動化顆粒分析成為可能，無論是過濾分離后還是直接在溶液中進行。

最近，基于人工智能的圖像分析工具已使用來自流式成像 等方法的圖像，改進并加速了硅油顆粒和其他顆粒類型的分類 。

表征樣品中的硅油顆粒群固然重要，但量化溶液中硅油的總量也至關重要。通常，核磁共振或電感耦合等離子體質譜等光譜方法用于此目的，它們能夠量化低至百萬分之一級的硅油。

六、監管視角

從監管角度看，微粒物質應像所有關鍵質量屬性一樣對待，重 點是確保過程控制和患者安全。為展示過程控制，收集有關整個開發過程中發現的顆粒粒徑分布和類型的歷史數據至關重要。這有助于建立產品的“正常范圍”，并識別顆粒的潛在來源。不同類型顆粒的安全影響可以通過計算機模擬、體外和體內模型系統進行探究，但最 終只能從實際臨床結果中確定。

有意義的規格是展示過程控制和確保產品安全的重要工具。美國食品藥品監督管理局期望在收集多批次數據后建立產品特定規格。了解典型的顆粒特征，包括存在的顆粒類型，是風險評估以及區分產品質量屬性和關鍵質量屬性的重要組成部分。如上所述，硅油液滴可能表現為亞可見顆粒，改變顆粒粒徑分布，有時甚至導致產品因亞可見顆粒數量明顯增加而未能通過亞可見顆粒批放行檢驗。對于構成亞可見顆粒群的顆粒進行表征，而不僅僅是確定顆粒粒徑分布，特別是在開發階段，是關鍵。

當硅油顆粒是由于給藥裝置變更（例如，從小瓶改為預灌封注射器）而引入時，其存在并不表示過程失控，而是改變初級容器眾所周知的效應。如果硅油的存在對產品沒有安全影響，則可以與監管機構討論如何處理這種情況，以及如何區分硅油顆粒與其他來源（如藥物本身）的顆粒。需要提供藥典方法之外的顆粒表征數據，以及風險評估計劃，以及如何區分硅油顆粒增加與其他具有不同安全性特征的顆粒類型增加。臨床試驗應設計為探究特定顆粒類型和關鍵質量屬性的安全性。強烈建議在行業內共享類似類型產品的臨床安全性特征，作為理解特定顆粒類型潛在安全風險的途徑。

標簽：生物制藥行業面臨的挑戰與策略