【柏恒科技小課堂】PCR反應程序優化之疾

圖1

首先，儀器運行設置選擇快速模式+模塊控溫的組合將反應時長進行極致壓縮。其次，在總時長不變的前提下合理分配循環段變性與退火延伸的時長。最后，在其次篩選出可用反應程序的基礎上進行微調，再一次縮短反應段的時長或在總時長允許的條件下適當延長反應段的時長以達到最優的反應效果。

因為快速試劑所用的擴增酶相較于普通試劑的酶來說有著更為快速的延伸速度，所以在設置退火延伸段反應時長時可以進行大幅度的壓縮。在壓縮變性反應時長時須注意，因為選用的是模塊控溫，如果變性時長過短會造成試劑的實際溫度不足95℃或95℃維持時長不夠而造成模板的解雙鏈不充分進而影響信號的積累，所以變性反應段的時長不宜過度極端。

柏恒Q9600系列可提供最快8℃/sec的升降溫速率，且具備等溫差梯度功能（如圖4），滿足常規試劑開發、檢測的同時也為快速試劑提供了一個很好的反應平臺。