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SCIEX微流高分辨質譜系統助力乳制品蛋白質組學研究

來源:SCIEX(愛博才思) 更新時間:2026-01-08 14:30:25 閱讀量:41
導讀:SCIEX微流高分辨質譜系統助力乳制品蛋白質組學研究

牦牛是高海拔地區如青藏高原的主要畜牧物種之一,為當地牧民提供必需的生活資源,包括肉類、乳制品和皮革等,在高原畜牧業中占據重要地位。牦牛奶作為一種獨特的乳制品資源,其營養價值高于牛奶、山羊奶及其他乳制品。牦牛奶中的主要蛋白質成分包括酪蛋白、乳清蛋白(α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白)以及乳脂球膜(MFGM)蛋白。


研究表明,牦牛奶具有多種功能特性,包括抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌、緩解疲勞、耐缺氧、降血壓和降膽固醇等作用。然而由于牦牛的生長環境、氣候條件和飼養方式的限制,牦牛奶的產量相對較低。犏牛作為黃牛與牦牛的雜交后代,產奶量比牦牛顯著提高,然而目前對于牦牛奶和犏牛奶之間蛋白質組成差異,尤其是功能性蛋白質的研究仍然有限。


中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所陳愛亮團隊在《Food Chemistry》上發表文章,基于SCIEX M5微升液相和TripleTOF? 6600高分辨質譜系統,利用蛋白質組學方法,比較了兩種奶中乳清蛋白和乳脂球膜(MFGM)蛋白的差異。結果顯示,犏牛奶中大多數上調的差異表達蛋白(DEPs)更多地參與促進鈣吸收、免疫調節和腸道健康,這些都是嬰兒生長發育所必需的營養物質。值得注意的是,對于重要的功能性蛋白,如乳鐵蛋白和骨橋蛋白,犏牛奶中的含量分別比牦牛奶高8.03倍和3.44倍。該研究為犏牛奶的潛在優勢提供了新的見解,并提供了科學依據。


牦牛奶和犏牛奶蛋白鑒定結果


經過高pH反相分級后,使用DDA采集模式,牦牛奶(yak)和犏牛奶(cattle-yak)一共鑒定到865種蛋白質和9011條肽段。使用SWATH采集方法分析了牦牛奶和犏牛奶的蛋白質組成,分別在牦牛奶和犏牛奶中鑒定出423種和433種蛋白質。進一步分析顯示,牦牛奶和犏牛奶分別鑒定出196種和194種乳清蛋白,以及227種和239種MFGM蛋白。在兩組中,有184種乳清蛋白和200種MFGM蛋白是共有的,表明牦牛奶與犏牛奶在蛋白質組成種類上沒有顯著差異。


牦牛奶和犏牛奶蛋白鑒定結果韋恩圖


盡管兩種奶中蛋白質的種類相似,主成分分析(PCA)仍能區分這兩種奶。兩組蛋白質的定量結果主成分分析如圖所示。同一組內的樣品聚集很好,而組間的分離程度更高,這表明兩種奶中共有蛋白質的含量存在顯著差異。


牦牛奶和犏牛奶蛋白質主成分分析圖


牦牛奶和犏牛奶差異蛋白質分析


以犏牛奶和牦牛奶比較進行蛋白質相對定量分析,t檢驗后選擇p<0.05且差異倍數(FC)>1.2或<0.83的蛋白質作為顯著差異表達蛋白(DEPs)。在乳清蛋白中,鑒定出34種差異蛋白,其中14種在犏牛奶中顯著上調,20種下調。在乳脂球膜(MFGM)蛋白中,發現44種差異蛋白,其中23種在犏牛奶中上調,21種下調,火山圖和熱圖如圖所示。


牦牛奶和犏牛奶差異蛋白分析的火山圖和熱圖


關鍵蛋白的靶向驗證


乳鐵蛋白和骨橋蛋白是牛奶中研究最廣泛的生物活性蛋白,兩種蛋白質都已被開發為食品添加劑,并廣泛用于嬰兒配方奶粉。因此,本研究特別關注牦牛奶和犏牛奶中這兩種蛋白質的差異,SWATH定量結果發現犏牛奶中的乳轉鐵蛋白和骨橋蛋白含量分別是牦牛奶的8.03倍和3.44倍。通過MRMHR方法進行靶向驗證,顯示的趨勢與SWATH方法一致,確認了分析數據的可靠性和準確性。


SWATH和MRMHR定量結果比較


總結


本文介紹了基于SCIEX M5微升液相和TripleTOF? 6600高分辨質譜系統進行牦牛奶和犏牛奶蛋白質組學的研究,使用SWATH技術比較了兩種奶的乳清蛋白和乳脂球膜蛋白的差異表達,并用MRMHR技術對目標蛋白進行了靶向驗證,顯示的趨勢與SWATH技術一致。該研究結果為進一步探索犏牛的育種及犏牛奶中的功能性蛋白提供了基礎,有助于高原畜牧業的可持續發展。


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參考文獻:

Chen X, Zhang J, Liu C, Sun X, Pang X, Qu S, Wu K, Lv X, Chen A. Proteomics-based study for evaluation crossbreeding advantages of cattle-yak milk. Food Chem. 2025 Dec 1;494:146188.


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