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利用基于 HTRF 的 Tag-lite 技術檢測胰高血糖 素 GLP-1 受體的 Kd 值
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本文由 美谷分子儀器(上海)有限公司 整理匯編
2024-09-10 21:48 677閱讀次數
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Cisbio 的 Tag-lite HTRF 平臺能 夠 有效 地 用 HTRF 熒 光團標記目標位點上感興趣的蛋白。細胞表面受體可以插入 SNAP-tag 質粒中,然后用這種結構轉染細胞并表達標記的受體。通過添加 snap -lumi4-Tb 底物,用鋱 (Tb)穴狀化合物標記受體。為了進行結合試驗,受體的配體用 HTRF 受體熒光團標記,例如 d2。當 d2 配體與鋱標記的受體結合時,可以使用具備 HTRF 功能的微孔板讀板機檢測受體到配體的時間分辨熒光共振能量轉移 (TRFRET)
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2022-04-26 16:20
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2024-09-28 05:36
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小鼠胰高血糖素樣肽(GLP-1)試劑盒檢測
- 小鼠胰高血糖素樣肽(GLP-1)試劑盒檢測本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:小鼠胰高血糖素樣肽GLP-1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知GLP-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GLP-1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GLP-1的濃度呈比例關系。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----小鼠胰高血糖素樣肽GLP-1操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:240pmol/L(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。120pmol/L(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液60pmol/L(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液30pmol/L(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液15pmol/L(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液7.5pmol/L(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pmol/L(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。小鼠胰高血糖素樣肽GLP-1試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的GLP-1標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的GLP-1含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-240pmol/L4、敏感度:0.1pmol/L[詳細]
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- 電話:021-6533363955229872網址:http://www.westang.com大鼠胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠GLP-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GLP-1與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠GLP-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,GLP-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GLP-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):50ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液至少作1:10稀釋(取20ul,加標本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成100ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入100ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品10000、5000、2500、1250、625、312、156、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應GLP-1含量,再乘上稀釋倍數即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GLP-1檢測濃度小于80pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠GLP-1。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產品樣冊
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人胰高血糖素樣肽(GLP-1)ELISA試劑盒說明書
- 用途:人GLP-1ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的GLP-1。本試劑盒可以檢測天然和重組的GLP-1。本試劑盒專用于科研、而非用于臨床診斷。ELISA試劑盒試驗原理:人GLP-1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知GLP-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GLP-1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GLP-1的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:240pmol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗GLP-1抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(60ml)1瓶(30ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性,但沒有實驗室可完全保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病,依據當地的安全條例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。2.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。3.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。4.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。ELISA試劑盒操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:240pmol/L(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。120pmol/L(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液60pmol/L(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液30pmol/L(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液15pmol/L(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液7.5pmol/L(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pmol/L(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(20×)的稀釋:蒸餾水20倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育15分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(pmol/L)A240240樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B120120樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C6060樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D3030樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E1515樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F7.57.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品結果分析以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的GLP-1標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的GLP-1含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。ELISA試劑盒試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與人其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。[詳細]
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2018-09-27 10:00
產品樣冊
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豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T0.1pmol/L-4pmol/L使用目的:本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中胰高血糖素樣肽1(GLP-1)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)水平。用純化的豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素樣肽1(GLP-1),再與HRP標記的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(8pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-10-08 10:01
產品樣冊
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小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒
- 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 21:00
應用文章
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人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯免疫檢測ELISA試劑盒
- 人試劑盒,人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯免疫檢測ELISA試劑盒使用說明書國內權威的科研試劑供應商,喬羽生物專業經營進口分裝和原裝、國產的Elisa試劑盒,品質保證,技術嚴格,無效果退款退貨。Elisakit規格:48孔配置/96孔配置酶標試劑:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿上海喬羽生物專業供應:使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本胰高血糖素樣肽1(GLP-1)含量。試驗原理:GLP-1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知GLP-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GLP-1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GLP-1的濃度呈比例關系。[詳細]
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2018-11-09 10:00
產品樣冊
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人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)ELISA試劑盒說明書
- 人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GLP-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GLP-1與單抗結合,加入生物素化的抗人GLP-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,GLP-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GLP-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):50ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成100ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入100ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應GLP-1含量,再乘上稀釋倍數即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GLP-1檢測濃度小于0.1ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人GLP-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數均小于10.2%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
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豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒使用說明書
- 豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒使用說明書[詳細]
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2024-09-30 14:22
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人胰高血糖素 (GC)說明書
- 人胰高血糖素(GC)說明書實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰高血糖素(GC)水平。用純化的人胰高血糖素(GC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素(GC),再與HRP標記的胰高血糖素(GC)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素(GC)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰高血糖素(GC)濃度。人胰高血糖素(GC)說明書試劑盒組成48孔配置96孔配置說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×96標準品:72ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶人胰高血糖素(GC)說明書各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。人胰高血糖素(GC)說明書[詳細]
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2018-10-23 10:30
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豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯免疫分析 試劑盒使用說明書
- 豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.1pmol/L-4pmol/L使用目的:本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中胰高血糖素樣肽1(GLP-1)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)水平。用純化的豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素樣肽1(GLP-1),再與HRP標記的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(8pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。4pmol/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液2pmol/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液1pmol/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液0.5pmol/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液0.25pmol/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-14 10:00
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人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒實驗使用說明書
- 人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒實驗使用說明書本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。本生試劑盒[詳細]
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2023-10-26 16:26
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