掃描電鏡全稱掃描電子顯微鏡(SEM),是介于透射電鏡和光學顯微鏡之間的一種微觀性貌觀察手段,可直接利用樣品表面材料的物質性能進行微觀成像。
掃描電鏡是1965年發明的較現代的細胞生物學究工具,主要是利用二次電子信號成像來觀察樣品的表面形態,即用極狹的電子束去掃描樣品,通過電子束與樣品的相互作用產生各種效應,其中主要是樣品的二次電子發射。二次電子能夠產生樣品表面放形貌像,這個像是在樣品被掃描時按時序建立起來的,即使用逐成像的方法獲得放大像。

掃描電鏡的優點:
1、能夠直接觀察樣品表面的結構,樣品的尺寸120mm×80mm×50mm。
2、樣品制備過程簡單,不用切成薄片。
3、樣品可以在樣品室中作三度空間的平移和旋轉,因此,可以從各種角度對樣品進行觀察。
4、景深大,圖象富有立體感。掃描電鏡的深較光學顯微鏡大幾百倍,比透射電鏡大幾十倍。
5、圖像的放大范圍廣,分辨率也比較高。可放大十幾倍到幾十萬倍,它基本上包括了從放大鏡、光學顯微鏡直到透射電鏡的放大范圍。分辨率介于光學顯微鏡與透射電鏡之間,可達3nm。
6、電子束對樣品的損傷與污染程度較小。
7、在觀察形貌的同時,還可利用從樣品發出的其他信號作微區成分分析。
掃描電鏡的缺點:
1、異常反差。由于荷電效應,二次電子發射受到不規則影響,造成圖像一部分異常亮,另一部分變暗。
2、圖像畸形。由于靜電場作用使電子束被不規則地偏轉,結果造成像畸變或出現階段差。
3、圖像漂移。由于靜電場作用使電子束不規則偏移引起圖像的漂移。
4、亮點與亮線。帶電樣品常常發生不規則放電,結果圖像中出現不規則的亮點和亮線。
透射電子顯微鏡,簡稱透射電鏡,是把經加速和聚集的電子束投射到非常薄的樣品上,電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關,因此可以形成明暗不同的影像。通常,透射電子顯微鏡的分辨0.1~0.2nm,放大倍數為幾萬~百萬倍,用于觀察超微結構,即小于0.2微米、光學顯微鏡下無法看清的結構,又稱“亞顯微結構”。
透射電鏡的優點:
光學顯微鏡和透射電子顯微鏡都使用用薄片的樣品,而透射電子顯微鏡的優點是,它比光學顯微鏡更大程度的放大標本。放大10000倍或以上是可能的,這使科學家可以看到非常小的結構。對于生物學家,如線粒體和細胞器,細胞,內部運作都清晰可見。透射電鏡標本的晶體結構提供了出色的分辨率,甚至可以顯示樣本內的原子排列。
透射電鏡的缺點:
透射電子顯微鏡需要在一個真空室制備標本。由于這一要求,在顯微鏡可以用來觀察活標本時,如原生動物一些微妙的樣品也可能被電子束損壞,必須先用化學染色或涂層來保護他們。這種ZL有時會破壞試樣。

在以存儲器器件為代表的集成電路芯片的電子顯微分,掃描電鏡由于使用方便,往往是微觀分析的shou選。另外不需要得到體內信號,結構信號,制樣方便,制樣周期短,需要非破性的分析,樣品表面結構保存好,沒有變形和污染,樣品干燥并且有良好導電性能使用掃描電鏡比較合適。
對于目標更小的分析需求以及要求高精度的場合,則必須進行透射電鏡分析,那些需要得到樣品內部結構的也需要選用透射電鏡。以前透射電鏡只是作為一種重要的科研儀器,然而當今的半導體制造由于采用了各種先進技術,器具逐漸縮小,透射電鏡得到了更多的應用。
在要求精度不是很高,制樣方便,有良好的形貌,不需要得到體內信號,結構信號場合。將掃描電鏡和透射電鏡有機的結合起來,相互補充,將能得到更加精確的分析結果。
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