藥典方案集錦 | 2025 版《中國藥典》 赭曲霉毒素 A 液相色譜分析方案

中藥材主要來源于自然界的動植物，在特定的生長、儲存、生產過程環境中，容易被真菌污染而產生真菌毒素，包括但不限于黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮等等。這些真菌毒素一般都具有強烈的毒性作用，影響人體健康。例如《中國藥典》2025 版在黃芪、檳榔中新增控制的赭曲霉毒素 A，就具有強烈的腎毒性，也會對胎兒發育產生影響。鑒于其強烈的毒性，《中國藥典》2025 版規定黃芪、檳榔中的赭曲霉毒素 A 不能高于 20μg/Kg。

針對赭曲霉毒素 A 的控制，《中國藥典》2025 版 第四部“2351 真菌毒素測定法”通則中，收錄了 HPLC-FLD 方法作為第 一法來檢測赭曲霉毒素 A。原理主要是根據赭曲霉毒素 A 具有受紫外光激發后能產生熒光的特性。該方法要求的檢出限為 1μg/kg。根據該方法的前處理條件，則溶液檢出限為 0.2ng/mL。

本文采用 1260 Infinity III 液相色譜系統搭配熒光檢測器，根據“2351 真菌毒素測定法”項下 赭曲霉毒素 A 測定 第 一法 色譜條件，完成了赭曲霉毒素 A 的方法建立與重現。具體實驗細節如下：

第 一部分

儀器系統

1260 Infinity III 液相色譜系統搭配熒光檢測器。

第二部分

色譜條件

色譜柱：SB-C18（250×4.6mm，5μm；PN：880975-902）

流動相：A：2% 乙酸；B：乙腈

等度洗脫：A:B=49:51

流速：1.0mL/min

柱溫：35℃

FLD：激發波長：333nm；發射波長：477nm

理論板數：以赭曲霉毒素 A 峰計不低于 10000；

第三部分

分析結果

采用“第二部分”色譜條件，對赭曲霉毒素 A 對照品、黃芪加標樣品進行了相關測試，結果如下。

靈敏度：

采用 0.1ng/mL 赭曲霉毒素A標準品溶液進行靈敏度測試，結果如下。“2351”通則中要求的溶液檢出限是 0.2ng/mL，本文采用 0.1ng/mL 對照品溶液，進樣 5μL 測試，信噪比為 16.18，檢出限濃度按照 S/N=3 計算，約為 0.02ng/mL，遠大于法規要求。

重復性：

采用 2.5ng/mL 赭曲霉毒素 A 對照品連續進樣 6 針，結果如下。數據顯示保留時間、峰面積 RSD 符合法規要求。

線性關系：

采用 2.5ng/mL 赭曲霉毒素A標準品溶液，分別進樣 5μL，10μL，15μL，20μL，25μL 進行線性關系測試，結果如下。線性相關系數>0.999，符合法規要求。

赭曲霉毒素 A 對照品：

黃芪加標樣品：

結論

本文采用 1260 Infinity III 液相色譜系統搭配熒光檢測器，完全重現了《中國藥典》2025 版 第四部中 通則“2351 真菌毒素測定法”赭曲霉毒素 A 測定的第 一法，同時進行的方法學驗證以及樣品加標測試，證明該套系統勝任赭曲霉毒素 A 的檢測，可用于中藥材、飲片等中藥中赭曲霉毒素 A 的質量控制，符合法規要求。

標簽：安捷倫