從 2025 年“微博熱搜”到 2025 版“中國藥典”——安捷倫二維液相平臺為維生素 D 軟膠囊雜質(zhì)分析領(lǐng)前沿

今年年初，國家衛(wèi)健委發(fā)布《2024 年中國居民營養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告》，再次將“維生素 D 缺乏”推至公共健康話題的前排。幾乎同一時(shí)間，多個(gè)社交平臺熱議“每日補(bǔ)充 400 IU 是否足夠”“深海魚油與 VD 同服安全性如何”“哪個(gè)品牌的 VD 產(chǎn)品性價(jià)比更高”。公眾的關(guān)注焦點(diǎn)迅速從“補(bǔ)多少”延伸到“補(bǔ)得純不純、穩(wěn)不穩(wěn)”。面對日趨嚴(yán)格的監(jiān)管訴求與消費(fèi)者的品質(zhì)期待，制藥企業(yè)亟需用數(shù)據(jù)回應(yīng)——軟膠囊中的維生素 D 及其有關(guān)物質(zhì)，能否被精準(zhǔn)、可重復(fù)、高效地測定？

安捷倫為您給出了一份“近似標(biāo)準(zhǔn)”的答案：基于 Agilent 1260 Infinity III 平臺的中心切割在線反相二維液相色譜法（RP x RP 2D-LC），首次在維生素 D 軟膠囊產(chǎn)品中實(shí)現(xiàn)維生素 D3、前維生素 D 與 5 種關(guān)鍵雜質(zhì)的一次進(jìn)樣、全分離、定量檢測，讓“極低含量”“極相似結(jié)構(gòu)”“極易被基質(zhì)掩蓋”的分析難題同時(shí)迎刃而解。

圖 1. 維生素 D3 及其有關(guān)物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)

為什么傳統(tǒng)方法“難測準(zhǔn)”？

維生素 D3 在光、熱條件下極易轉(zhuǎn)化為前維生素 D3、反式維生素 D3、速甾醇及光甾醇等同分異構(gòu)體。這些雜質(zhì)與主成分結(jié)構(gòu)差異極小，紫外吸收特征又高度重疊；軟膠囊內(nèi)容物常以大豆油、玉米油、橄欖油及魚肝油等基質(zhì)為載體，高濃度甘油三酯導(dǎo)致強(qiáng)背景干擾。目前國外藥典或 25 版中國藥典對于 VD 復(fù)雜制劑中有關(guān)物質(zhì)的檢測采用離線制備的方法，無論是正相還是反相制備，要么因樣品前處理步驟繁多而回收率波動，要么因基質(zhì)共流出而分離度不足，最終使得“檢出”與“準(zhǔn)確定量”之間始終存在一條難以逾越的“障礙”。

安捷倫 2D-LC：如何實(shí)現(xiàn)“測得準(zhǔn)”

單中心切割在線二維液相的核心思路，是把“凈化”與“分離”在同一套系統(tǒng)中里按出峰順序完成：

初始階段，閥位置為 1-2，一維色譜柱完成維生素 D 制劑的樣品凈化，同時(shí)二維色譜柱流動相平衡；

轉(zhuǎn)移階段，閥位置為 6-1，一維色譜將含有維生素 D 及其有關(guān)物質(zhì)的餾分轉(zhuǎn)移至捕集柱中；

二維分析階段，閥位置為 1-2，二維泵使用高比例的有機(jī)相的流動相將捕集柱柱上的樣品轉(zhuǎn)移至二維色譜柱進(jìn)行分離，實(shí)現(xiàn)維生素 D 及其有關(guān)物質(zhì)的分離和分析。

圖 2. 在線中心切割二維柱切換系統(tǒng)示意圖

數(shù)據(jù)背后的真相與價(jià)值

圖 3. 混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的第一維和第二維分離譜圖

（1.雜質(zhì) A；2.雜質(zhì) D；3.前維生素 D3；4.雜質(zhì) E；5.維生素 D3；6.雜質(zhì) C；7.雜質(zhì) B)

圖 4. 維生素 D 滴劑不同制劑樣品分析譜圖及二維分離放大譜圖（28min~70min）

1．雜質(zhì) A（impurity A）2．雜質(zhì) D（impurity D）3．前維生素 D3（pre-vitamin D3）4．雜質(zhì) E（impurity E）5．維生素 D3（vitamin D3）6．雜質(zhì) C（impurity C）

圖 3 是混合標(biāo)準(zhǔn)品的一維和二維色譜圖，圖 4 為維生素 D 軟膠囊新制樣品及加速 6 個(gè)月制劑樣品的譜圖。利用中心切割二維液相色譜方法可以有效去除基質(zhì)成分干擾，實(shí)現(xiàn)主成分和目標(biāo) 5 個(gè)雜質(zhì)成分的分離分析；通過對比加速穩(wěn)定性測試樣品，可見雜質(zhì) D（反式-VD3）與雜質(zhì) E（速甾醇）的含量升高，該方法可實(shí)現(xiàn)維生素 D3 的 6 種主要有關(guān)物質(zhì)的分析，除 25 版中國藥典規(guī)定的前 VD、反式 VD 和速甾醇之外，還增加了 EP 歐洲藥典中提到的異速甾醇和光甾醇等，為維生素 D3 制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及生產(chǎn)工藝優(yōu)化提供了可靠的技術(shù)支撐。

從單品種應(yīng)用到 2DLC 平臺化方案

維生素 D 軟膠囊有關(guān)物質(zhì)分析檢測是安捷倫二維液相應(yīng)用方案的“冰山一角”。安捷倫早已將二維液相方法拓展至不同領(lǐng)域：

從綠皮火車到高鐵：安捷倫告訴您維生素 A、D、E 如何快速檢測

GB 5009.296-2023《食品中維生素 D 的測定》可以使用二維液相色譜及在線固相萃取-二維液相色譜技術(shù)啦

最新文章一網(wǎng)打盡 | 安捷倫 2D-LC 液相色譜中藥/天然產(chǎn)物應(yīng)用快報(bào)（上篇）

最新文章步步登高 | 安捷倫 2D-LC 液相色譜中藥/天然產(chǎn)物應(yīng)用快報(bào)（下篇）

結(jié)語

公眾對營養(yǎng)補(bǔ)充劑的信任，來自企業(yè)對質(zhì)量控制的每一分投入；而每一次投入，都需要可靠、合規(guī)、可轉(zhuǎn)移的分析工具作為底座。安捷倫 1260/1290 Infinity III 二維液相平臺，用與國內(nèi)外藥典同源的嚴(yán)謹(jǐn)與領(lǐng)先行業(yè)的分離度和靈敏度，為維生素 D 軟膠囊的雜質(zhì)分析立下新的標(biāo)桿——讓“熱搜”不再只是話題，而是成為推動標(biāo)準(zhǔn)升級、守護(hù)消費(fèi)者健康的起點(diǎn)。

標(biāo)簽：安捷倫